Контроль стерильности: простое руководство
Зачем нужен контроль стерильности?
Контроль стерильности необходимо проводить для фармацевтических продуктов, которые должны быть стерильными по определению: инъекций, глазных капель, твердых лекарственных средств и некоторых медицинских устройств. Если такие продукты загрязнены микроорганизмами, это может снизить их эффективность или вызвать инфекции.
Основная цель контроля — убедиться, что продукты, прошедшие стерилизацию, не содержат живых микроорганизмов. Это гарантирует их безопасность и эффективность при использовании.
Что такое стерильность?
Стерильность означает полное отсутствие живых микроорганизмов в продукте.
Международный стандарт стерильности — уровень гарантии стерильности (SAL) — это вероятность того, что отдельное изделие, подвергнутое стерилизации, останется нестерильным. Выражается 10-n, а наиболее часто используемые значения для стерилизации — 10-3 или 10-6.
Продукт считается стерильным, если вероятность его загрязнения микроорганизмами не превышает 1 на миллион (SAL ≤ 10⁻⁶).
Как проводится контроль стерильности?
Существует два основных метода в зависимости от типа образца:
Метод мембранной фильтрации
Этот метод подходит для жидких образцов, твердых препаратов и медицинских устройств, которые можно промывать / фильтровать.
Как это работает:
- Образец пропускают через мембрану с мелкими порами (0.02, 0.2, 0,45 мкм и др. в зависимости от размера микроорганизма, который необходимо задержать).
- Микроорганизмы, если они есть, задерживаются на мембране.
- Мембрану переносят в питательную среду и инкубируют.
- Если микроорганизмы присутствуют, они начинаютрасти.
Оборудование для метода мембранной фильтрации
Необходимое оборудование включает вакуумные насосы, коллекторы фильтрации и мембранные фильтры. Воронки из нержавеющей стали можно автоклавировать или стерилизовать пламенем с помощью лабораторной горелки, чтобы сэкономить время стерилизации.
Этапы работы метода мембранной фильтрации
Рабочий процесс метода мембранной фильтрации для тестирования стерильности можно в целом разделить на четыре этапа: предварительная обработка образца, фильтрация образца, инкубация мембраны и интерпретация результатов. Ниже будет дано объяснение каждого этапа в последовательности.
- Предварительная обработка образца: в зависимости от типа образца перед фильтрацией требуется предварительная обработка для улучшения скорости потока или подготовки образца к фильтрации.
Тип образца | Фильтруемые жидкости | Мази и масла | Твердые антибиотики | Медицинские приборы |
Метод предварительной обработки | Если раствор слишком вязкий, разбавьте его стерильной жидкостью. | Растворить в изопропилмиристате, при необходимости нагреть (до 44°C). | Растворить в стерильном растворе. | Промойте стерильным раствором и отфильтруйте промывочную жидкость. |
- Фильтрация образца. Вылейте предварительно обработанный образец в воронки фильтра. Используйте вакуумный насос для создания отрицательного давления, что позволит проводить вакуумную фильтрацию. Для больших объемов можно использовать многоотводные коллекторы фильтрации.
- Инкубация мембраны. Перенесите мембрану в питательную среду с помощью стерильного пинцета, запечатайте и инкубируйте при соответствующей температуре в течение 14+ дней.
- Интерпретация результатов. Наблюдайте за ростом микроорганизмов в питательной среде. Если никаких изменений не происходит, образец стерилен и соответствует требованиям испытаний на стерильность. Если среда становится мутной, это указывает на присутствие жизнеспособных микроорганизмов, что означает, что образец не соответствует требованиям стерильности.
Метод прямой инокуляции
Этот метод используется для образцов, которые нельзя фильтровать. Образец напрямую вносят в питательную среду и инкубируют для выявления микроорганизмов.
Принцип заключается в непосредственном помещении образца в питательную среду и мониторинге роста микроорганизмов для оценки стерильности.
Этапы работы по методу прямой инокуляции
Рабочий процесс метода прямой инокуляции можно в целом разделить на три этапа: подготовка образца, инкубация питательной среды и интерпретация результатов. Ниже приводится объяснение каждого этапа в последовательности.
1.Подготовка образца. После подготовки образца поместите его в питательную среду.
Тип образца | Твердые образцы | Образцы жидкости | Медицинские приборы |
Методы приготовления | Для приготовления суспензии используйте подходящий растворитель, обеспечивающий равномерный контакт образца с питательной средой. | Добавьте необходимое количество непосредственно в питательную среду для инкубации. | Погрузите все устройство или подходящую его часть непосредственно в питательную среду, убедившись, что все поверхности, которые могут контактировать с микроорганизмами, полностью покрыты питательной средой. |
2.Инкубация питательной среды. Герметично закройте питательную среду и инкубируйте в течение 14+ дней.
3.Интерпретация результатов. Наблюдайте за мутностью питательной среды, чтобы определить стерильность. Если никаких изменений не происходит, образец стерилен и соответствует требованиям испытаний на стерильность. Если среда становится мутной, это указывает на присутствие жизнеспособных микроорганизмов, что означает, что образец не соответствует требованиям стерильности.
Сравнение методов: мембранная фильтрация и прямая инокуляция
Выбор между методами мембранной фильтрации и прямой инокуляции зависит от характеристик образца для обеспечения точности и надежности.
Тестирование на стерильность | Метод мембранной фильтрации | Метод прямой инокуляции |
Применимые образцы | Жидкие образцы, растворимые образцы, медицинские приборы с трубками | Образцы, непригодные для мембранной фильтрации, такие как высоковязкие растворы или специализированные медицинские устройства |
Принцип работы | Использует мембрану с размером пор ≤0,45 мкм для захвата микроорганизмов с последующей мембранной инкубацией | Непосредственно культивирует образец в среде и наблюдает за ростом микроорганизмов. |
Необходимое оборудование | Мембраны, вакуумный насос, система фильтрации коллектора, держатель фильтра из нержавеющей стали, стерилизационное оборудование (например, стерилизация пламенем с помощью горелки Бунзена или автоклавирование) | Питательная среда, стерильные контейнеры |
Дни инкубации | 14 дней и более | 14 дней и более |
Заключение
Контроль стерильности — это важный этап контроля качества в фармацевтической промышленности и медицине. Оно гарантирует, что продукты, которые должны быть стерильными, действительно являются таковыми.
Помните, для метода мембранной фильтрации важно выбрать качественное оборудование. Оно должно обеспечивать:
- Высокую точность фильтрации.
- Надежность и простоту в использовании.
- Соответствие международным стандартам.