Полимеразная цепная реакция (ПЦР)
|
|
|
Полимеразная цепная реакция - это метод, который используется для быстрого создания миллионов копий определенного фрагмента ДНК или для амплификации фрагмента ДНК для дальнейшего анализа.
• qPCR – или “количественная ПЦР” позволяет обнаруживать амплификацию на каждом цикле в режиме реального времени. Метод используется для обнаружения специфических генов, для диагностики инфекционного заболевания или рака.
• RT-qPCR или количественная ПЦР с обратной транскрипцией. Этот метод используется с РНК в качестве отправной точки, это транскрибируется во взаимодополняющую ДНК перед амплификацией. Данный метод служит для обнаружения специфических молекул РНК или РНК-вирусов, таких как SARS-CoV-2 (коронавирус тяжёлого острого респираторного синдрома‑2 ). Именно RT-qPCR стал оптимальным решением для клинической диагностики коронавируса в образцах пациентов, поскольку этот метод обеспечивает самую высокую чувствительность и наибольшую точность по сравнению с альтернативными методами. Использование метода ПЦР для диагностики вируса SARS-CoV-2: Реагенты обычно хранятся в низкотемпературных условиях, с применением высокопроизводительных лабораторных холодильников или морозильников сверхнизких температур, температура которых может опускаться до -80 ° C, при определенных требованиях к реагентам. Подготовка образцов осуществляется в шкафу биологической безопасности. Для ручной подготовки можно использовать многоканальные электронные пипетки для автоматической обработки жидкости. Дозатор реагентов может использоваться в сочетании с приборами для автоматического выделения нуклеиновых кислот. Вместо того, чтобы инактивировать вирусные частицы химическими реагентами, образцы можно также инактивировать нагреванием и подавать прямо в прибор ПЦР.Это сокращает общее время тестирования примерно до 50 минут, но не одобрено CE-IVD (Европейский сертификат соответствия для диагностики in vitro). |